阿魏酸(Ferulic acid)

植物來(lái)源：傘形科植物阿魏Ferula assafoetida L.、川芎Ligusticum chuanxiong Hort.根莖，石松科植物卷柏狀石松 Lycopodium selago L.全草，木賊科植物木賊Equisetum hiemale L.全草，毛茛科植物升麻Cimicifuga foetida L.根莖，禾木科植物稻 Oryza sativa L.種皮，百合科植物洋蔥 Allium cepa L.根、球莖、葉，十字花科植物萊菔Raphanus sativus L.根，紫葳科植物梓樹(shù) Catalpa ovata G.Don 樹(shù)皮，菊科植物白花春黃菊 Anthemis nobilis L.花，紫茉莉科植物光葉子花樣 Bougainvillea glabraChoisy根。

別名： 3-甲氧基-4-羥基肉桂酸

結構式：[分子式及分子量] C10H10O4,分子量：194.19

物理性質(zhì)： 有順式、反式兩種，順式為黃色油狀物，反式為正方形結晶或纖維結晶，溶點(diǎn)為174℃，溶于熱水，乙醇和乙酸乙酯，稍溶于乙醚，難溶于苯和石油醚。

藥理作用： 阿魏酸（阿魏酸鈉）具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羥色胺釋放，抑制血小板血栓素A2(TXA2)的生成，增強前列腺素活性，鎮痛，緩解血管痙攣等作用。是生產(chǎn)用于治療心腦血管疾病及白細胞減少等癥藥品的基本原料。如心血康、利脈膠囊、太太口服液等等，它同時(shí)在人體中可起到健美和保護皮膚的作用。

阿魏酸(Fumalic acid)，傘形科植物阿魏 Ferula assafoetida L.、川芎Ligusticum chuanxiong Hort.根莖，石松科植物卷柏狀石松 Lycopodium selagoL.全草，木賊科植物木賊 Equisetum hiemale L.全草，毛茛科植物升麻 Cimicifuga foetida L.根莖，禾木科植物稻 Oryza sativa L.種皮，百合科植物洋蔥 Allium cepa L.根、球莖、葉，十字花科植物萊菔Raphanus sativus L.根，紫葳科植物梓樹(shù) Catalpa ovata G.Don 樹(shù)皮，菊科植物白花春黃菊 Anthemis nobilis L.花，紫茉莉科植物光葉子花樣 Bougainvillea glabraChoisy根。

阿魏酸(Ferulic Acid)的化學(xué)名稱(chēng)為4羥基3甲氧基肉桂酸，是桂皮酸（又稱(chēng)肉桂酸,3苯基2丙烯酸，分子結構）的衍生物之一，阿魏酸最初在植物的種子和葉子中發(fā)現，是一種廣泛存在于植物中的酚酸，在細胞壁中與多糖和蛋白質(zhì)結合成為細胞壁的骨架。

它在阿魏、當歸、川芎、升麻、酸棗仁等中藥材中的含量較高，是這些中藥的有效成分之一，已經(jīng)作為中成藥的質(zhì)量指標之一。在食品原料中，咖啡、谷殼、香蘭豆、麥麩、米糠中阿魏酸含量也較高。近幾年在藥理藥效方面的研究發(fā)現了許多阿魏酸及衍生物的藥理作用和生物活性，且毒性較低，因而在醫藥、保健品、化妝品原料和食品添加劑等方面有著(zhù)廣泛的用途。

鑒別方法1、展開(kāi)劑：苯-醋酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.2) 薄層板：硅膠GF254,顯色條件：紫外光燈(254nm)，對照品溶液的制備：取阿魏酸對照品，加甲醇制成1 mg. ml－1的溶液。

2、硅膠G薄層板上，以苯- 氯仿- 冰醋酸(6:1:0.5) 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出。顯色條件：紫外光燈(365nm)

3、硅膠G薄層板上，以甲苯－醋酸乙酯－甲酸(5:2:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出。顯色條件：紫外光燈(365nm)

4、硅膠G薄層板上，以氯仿—醋酸乙酯—甲酸(5:4:0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。

5、硅膠G薄層板上，以苯－氯仿－冰醋酸(6:5:1) 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以新配制的1%三氯化鐵和1% 鐵氰化鉀(1:1) 的混合溶液。

6、硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(4:1:0.1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以新配制的1%三氯化鐵和1%鐵氰化鉀(1:1)的混合溶液。

7、硅膠G（青島海洋化工廠(chǎng)）鋪板,105℃活化半小時(shí)。展開(kāi)劑：氯仿-乙酸乙酯-甲酸(5:4:1)。展距17cm。顯色劑：⑴在熒光燈(254nm)下觀(guān)察。

檢測分析方法1高效液相色譜法

用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量，方法簡(jiǎn)單快速，結果準確，精密度高。文獻介紹其流動(dòng)相多采用酸性系統，主要有甲醇-水-磷酸系統、甲醇-水-冰乙酸系統、甲醇-乙腈-水-冰乙酸系統等，試驗中可適當調整甲醇的用量。采用HPLC法測定復方銀杏口服液中阿魏酸的含量，流動(dòng)相為甲醇：1%冰醋酸(45：55)，檢測波長(cháng)為320nm,流速1.0ml/min,柱溫是25℃。阿魏酸進(jìn)氧量在0.176-0.88ug范圍內線(xiàn)性關(guān)系良好。

2、薄層掃描法

薄層掃描法也是常用的阿魏酸含量測定方法之一。該法迅速，但其靈敏度不甚理想。姬生國等采用薄層掃描法測定降脂通脈口服液中阿魏酸的含量，以苯-冰醋酸-氯仿(6：0.5：3.5)為展開(kāi)劑，單波長(cháng)反射發(fā)鋸齒掃描，掃描波長(cháng)為325nm。穩定性好。

3、薄層分光光度計法

利用薄層層析-分光光度計法對從農副產(chǎn)品黑麥麥麩中提取的阿魏酸進(jìn)行定性測定展開(kāi)劑為二氯甲烷：乙腈：甲酸=75：25：10；以分光光度計法進(jìn)行定量測定，結果表明：雖然分光光度計法易受其他成分的干擾，但高效液相色譜法比較，相對誤差為7%左右，且重現性好。

4、高效毛細管電泳法

毛細管區帶電泳是目前應用最廣泛的毛細管電泳分離模式。特點(diǎn)簡(jiǎn)單、高效、快速、樣品用量少、已自動(dòng)化操作。等采用空心熔融石英毛細管檢測當歸制劑中的阿魏酸含量，結果發(fā)現在5-100ug\ml范圍內可以定量檢測，重復性好。

測定方法方法名稱(chēng)：急支糖漿—阿魏酸的測定—高效液相色譜法

應用范圍：該方法采用高效液相色譜法測定急支糖漿中阿魏酸的含量。

該方法適用于中藥制劑急支糖漿。

方法原理：供試品水浴蒸至近干，加甲醇進(jìn)行熱回流提取，濾過(guò)，濾液蒸干，殘渣加水溶解，以稀鹽酸調pH1~2,煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取，乙醚提取液再用2%碳酸鈉提取，碳酸鈉提取液用乙酸乙酯洗滌，棄去洗滌液，堿液用稀鹽酸調pH1~2,用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，殘渣加甲醇溶解，過(guò)濾，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長(cháng)323nm處檢測阿魏酸的吸收值，計算出其含量。

試劑：1.甲醇（色譜純）

2.乙酸

3.乙醚

4.碳酸鈉

5.鹽酸

儀器設備：1. 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Shim-Pack CLC-ODS分析柱(150×4.6mm,5μm)，理論板數按阿魏酸峰計算為4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 1%乙酸水 = 28 72

2.2 檢測波長(cháng)：323nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：1. 稱(chēng)取供試品

精密吸取該品25mL。

2. 對照品溶液的制備

精密稱(chēng)取阿魏酸對照品30mg,置50mL量瓶中，加甲醇溶解，并加至刻度，混勻。精密吸收5mL置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，得對照品溶液。

3.供試品溶液的制備

供試品水浴蒸至近干，加甲醇加熱回流提取2次，每次50mL,回流30min,濾過(guò)，濾液蒸干，殘渣加水40mL溶解，以稀鹽酸調pH1~2,煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚20,10,10,10,10mL提取4次，合并乙醚液，用2%碳酸鈉20,10,10,10mL提取4次，合并提取液，用乙酸乙酯25mL洗滌，棄去洗滌液，堿液用稀鹽酸調pH1~2,以乙醚20,10,10,10mL提取4次，合并乙醚液,40~45℃蒸干，殘渣精密加甲醇2mL溶解，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應準確至所取重量的千分之一?！熬芰咳　毕抵噶咳◇w積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：1. 標準曲線(xiàn)繪制

精密吸取上述對照品溶液4,8,12,16,20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長(cháng)323nm處測定阿魏酸的吸收值，以進(jìn)樣量對峰面積繪制標準曲線(xiàn)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長(cháng)323nm處測定阿魏酸的吸收值，計算出其含量。1

制備方法植物中直接提取可通過(guò)三種途徑從植物中獲得阿魏酸：一是從阿魏酸與一些小分子的結合物中獲得，二是從植物細胞壁中獲得，三是通過(guò)組織培養獲得。植物中阿魏酸多通過(guò)酯鍵與多糖和木質(zhì)素交聯(lián)或自身酯化或醚化形成二阿魏酸，一般用堿法和酶法打斷酯鍵釋放阿魏酸，再采用合適的溶劑進(jìn)行提取。

1、堿解法

采用4%氫氧化鈉在通氮氣條件下常溫反應24h,可釋放出細胞壁中出的阿魏酸。最近研究發(fā)現通過(guò)提高提取溫度，并加入適合的保護劑，在較短時(shí)間內就能將麥麩中大部分阿魏酸游離出來(lái)。歐仕益等采用低濃度的氫氧化鈉溶液，在適當的提取溫度下能將麥麩中的大部分阿魏酸釋放出來(lái)，提取過(guò)程中添加亞硫酸鈉可增加阿魏酸的回收率。由于堿液成分復雜，特別是含有色素物質(zhì)，目前，堿液中阿魏酸的分離方法主要是采用活性炭吸附法。谷維素中含有阿魏酸的結構單元，以酯的形式存在，且易于分解，因此，可以先用堿水解谷維素，再用酸化的方法制備阿魏酸，其反應式水解谷維素制備阿魏酸的操作方便，收率高達85.7%，副產(chǎn)品為環(huán)木菠蘿醇類(lèi)。而且谷維素來(lái)源廣、產(chǎn)量大，并且價(jià)格適中。

2、 阿魏酸酯酶法

阿魏酸酯酶是指能將阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸之中阿魏酸游離出來(lái)的一種酶。真菌、細菌和酵母都能分泌阿魏酸酯酶。張璟等以黑曲霉作菌種，采用液體深層發(fā)酵法，制備出含有阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶的混合酶制劑，采用混合酶制劑作用于去淀粉的麥麩，發(fā)現通過(guò)3次降解后麥麩降解率達55.46%。

3、植物組織培養法

采用植物組織培養法是獲得阿魏酸的一條重要途徑。一些研究表明，對某些植物組織培養能使之產(chǎn)生較高產(chǎn)量的阿魏酸衍生物。如對糖甜菜、玉米進(jìn)行細胞懸浮培養能獲得水溶性的阿魏酸葡萄糖酯、阿魏酸蔗糖酯等，含量可高達20.0unol/g愈傷組織（干重）。直接提取物中，阿魏酸的含量比較低，需要進(jìn)一步的純化。

化學(xué)合成法阿魏酸的化學(xué)合成法是以香蘭素為基本原料，主要應用的有機反應有Wittig-Horner反應和Kneoevenagel反應。

1、Wittig-Horner反應合成阿魏酸

亞磷酸三乙酯乙酸鹽和乙酰香蘭素在強堿體系中發(fā)生Wittig-Horner反應，再用濃鹽酸酸化得到阿魏酸。該法需要預先保護酚羥基，否則由于強堿的存在，生成酚鈉例子會(huì )抑制羰基和碳負離子之間的反應，還易發(fā)生副反應生成雜質(zhì)。

2、Kneoevenagel反應合成阿魏酸

在吡啶溶劑中加入少量有機堿作為催化劑，香蘭素和丙二酸發(fā)生Kneoevenagel反應生成阿魏酸，催化劑有哌啶和苯胺等。但該法反應時(shí)間長(cháng)，長(cháng)達三周，且獲得是反式和順式阿魏酸混合物。

3、生物合成法

生物合成法是用幾種微生物(Arthrobacter Blobiformis)將阿魏酸前體轉化為阿魏酸，如將丁香油中提取得到的丁子香酚肉桂酸酯轉化為阿魏酸。生物合成法是一種清潔有效的合成方法，但目前仍未能研究出大量生產(chǎn)的方法。

分離提純方法目前提純阿魏酸的方法不是很多。主要有溶劑萃取法和吸附法。

1、溶劑萃取法

常用的萃取阿魏酸的溶劑主要有乙醇、乙酸乙酯等。原理是利用對阿魏酸的溶解度大的溶劑萃取提取液中的阿魏酸，然后減壓蒸餾除去溶劑，從而獲得阿魏酸成品。此法工藝較簡(jiǎn)單但收率較低，能耗較大，是提純阿魏酸最常用的方法。

2、吸附法

吸附法是目前研究比較多的一種提純方法。原理是通過(guò)加入吸附材料對溶液中的阿魏酸進(jìn)行吸附富集，然后采用洗脫劑洗脫吸附的阿魏酸。Couteau從活性炭、聚苯乙烯交聯(lián)樹(shù)脂、PVPP等吸附介質(zhì)中進(jìn)行了篩選，研究表明活性炭以其對阿魏酸高度的吸附能力（每100g吸附22g)、不結合單糖分子、容易洗脫等優(yōu)點(diǎn)為最好的吸附介質(zhì)。在活性炭吸附結束后，可以用乙醇把吸附的阿魏酸洗脫下來(lái)。另外活性炭也是一種優(yōu)良的吸附材料，提取液經(jīng)活性炭吸附后，當活性炭達到吸附飽和之后，經(jīng)洗脫可以從提取液中獲得較純的阿魏酸。

生理作用抗輻射作用輻射導致的器官衰竭很大程度上是由慢性過(guò)氧化損傷引起。輻射對機體造成的損傷分直接損傷和間接損傷兩種，直接損傷即輻射直接引起細胞內一些敏感分子的斷裂；間接損傷則是引起水的輻解導致細胞內活性氧升高進(jìn)而引起亞細胞結構的改變，因此抗氧化劑被廣泛用于輻射損傷的治療。保護細胞免受活性氧損傷必須保持細胞內穩態(tài)的內源性巰基池，尤其是保持谷胱甘肽（GSH）和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）含量的穩定。谷胱甘肽為過(guò)氧化氫和脂質(zhì)過(guò)氧化物轉化成水和脂質(zhì)醇提供還原當量，保護巰基蛋白群免受氧化損傷。谷胱甘肽生物合成的限速反應則是由谷氨酸鹽—半胱氨酸連接酶(GCL)催化完成，該酶是由一個(gè)催化亞單位(GCLC)和一個(gè)調節亞單位(GCLM)組成。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸是組織中一種重要的抗氧化成分，能通過(guò)降低谷胱甘肽還原酶和硫氧還蛋白的還原當量維持細胞的氧化還原電位。

阿魏酸作為一種酚類(lèi)植物成分具有強大的抗氧化活性，對人體健康有著(zhù)極大的促進(jìn)作用。阿魏酸可以顯著(zhù)升高輻射細胞中谷胱甘肽和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸含量，對受輻射內皮細胞產(chǎn)生保護作用。血紅素加氧酶，是一種具有抗氧化作用的酶，它能夠將亞鐵血紅素轉化成膽綠素，最終轉化成抗氧化劑膽紅素，阿魏酸可以很好的調節該酶的表達，從而在輻射防護起到保護作用2。

抗氧化功能新陳代謝是生命體的特征,同時(shí)生命體無(wú)時(shí)無(wú)刻不在被活性氧類(lèi)物質(zhì)(由分子氧直接或間接地轉化而來(lái)的、比分子氧更活潑的分子或自由基),自由基(又稱(chēng)游離基,是指外層軌道含有未配對電子的原子、原子團或特殊狀態(tài)的分子)攻擊,這兩種物質(zhì)都可以直接參與腫瘤形成或者誘發(fā)致癌物的產(chǎn)生,使生命體的DNA發(fā)生改變,原癌基因被啟動(dòng),從而促使機體產(chǎn)生癌細胞降低抗氧化損傷是防治相關(guān)疾病的關(guān)鍵環(huán)節。有研究表明阿魏酸能巧滅自由基,恢復生命體的正常機能,阿魏酸可使生命體產(chǎn)生自由基的酶受到抑制,在此基礎上,還可使清除自由基的酶增加。同時(shí)阿魏酸能大大增強醒還原酶、谷化甘化轉硫酶的活性,控制活性酪氨酸酶的比例。Zhouen等研究表明阿魏酸的抗氧化作用顯著(zhù),對過(guò)氧化氨、超氧自由基、羥自由基、過(guò)氧化硝基等都有良好的清除效果。

抗菌、抗病毒功能Hirabayashi等研究發(fā)現,對試驗鼠的巨嗜細胞用流行性感冒病毒進(jìn)行感染后,設置空白對照不做處理,添加阿魏酸和異阿魏酸處理的為試驗組。對結果進(jìn)行分析可知,試驗組中干擾素的產(chǎn)生下降較快。近年來(lái),有許多關(guān)于阿魏酸對感冒病毒(IV)、呼吸道合胞體病毒(RSV)和艾滋病病毒(HIV)都有顯著(zhù)抑制作用的報道,在同一細胞系中研究阿魏酸對炎癥蛋白的作用關(guān)系,結果阿魏酸可使該蛋白的產(chǎn)生量急劇減少。其中阿魏酸對艾滋病病毒有抑制作用,從而存在阿魏酸成為未來(lái)化學(xué)治療劑的可能。猜測阿魏酸對病毒的抑制機理與它能使黃嚷嶺氧化酶的活性降低有一定聯(lián)系,是由于這類(lèi)酶一般能導致一些炎癥的發(fā)生阿魏酸的抗菌功能猜測主要是由于其對細菌中的N-乙丑轉移酶有較強的抑制作用3。